HELC使用经验谈——样品进样技巧

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HELC使用经验谈——样品进样技巧
                         作者：柏青

由于一般分析过于注重色谱分析本身的性能好坏，对于进样操作，可能考虑得较为简单。其实从数据的可靠性这一观点来看，进样操作是一项很重要的，相对要求严格的操作。
我们常有这样的经历，在用手动进样器进样分析时，标准曲线缺乏直线性，出现不良峰，等量注入同样试样而色谱峰的重现性却不好，现以我们最常用的7725型进样阀为例加以说明：
在随阀说明书上是这样指示的。
（1）在把手柄处于进样的位置（以下称进样状态）时。使用附属的针口清洁器和注射器，注入清洗液（通常为移动相）清洗针口。
（2）把手柄扳到load装置的位置（以下称装填状态）插入微量注射器。
（3）注入微量注射器内的样品。
（4）切到进样状态。
（5）在进样状态下拔出微量注射器。

这一系列的操作中（1）是非常重要的操作，这一步如有疏漏便容易发生上面提到的毛病。这是由于进样器针口的污染造成的。在结束（4）的操作后，如果在微量注射器的针尖上有样品黏附，或在针尖与进样器的定子面之间有间隙，将有样品残留，如在此状态下进行（5）的操作，则残留的样品将扩散到整个针口。如果在这里省去（1）而移到（2）的操作，则此样品将被挤入样品产生所谓的交叉污染。因此（1）的操作即预先洗掉残留样品，这是防止故障的关键。但是，每次注入样品时都必须清洗针口，这又是件非常麻烦的事（一般，许多人都省掉这一步，这是错误的）有没有多少方便些的办法呢？这里可以考虑的是以下的顺序。
（1）      进状态时，插入微量注射器。
（2）      转换到装填状态，注入微量注射器内的样品。
（3）      转换回进样状态。
（4） 在进样状态下拔出微量注射器。与前面方法的不同之处在于：是在装填状态下插入微量注射器，还是在进样状态下插入。如果在进样状态下插入则即使残留有前次注入的样品，它也将被挤出到排除管方向去，而不会引起交叉污染，这个顺序在进样器的样品回路容量比较小（50ul以下）的时候是十分有效的方法。